技術(shù)文章
Technical articles在醫(yī)學(xué)研究的浩瀚星河中,有一種“特殊替身”始終默默奉獻,它們承載著人類探索疾病奧秘、研發(fā)診療方案的希望,這就是動物疾病模型。從基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的機制研究到臨床醫(yī)學(xué)的藥物試驗,動物疾病模型如同連接實驗室與臨床的橋梁,為人類健康事業(yè)的突破筑牢根基,成為不可替代的科研利器。所謂動物疾病模型,是指通過人工干預(yù)(如基因編輯、藥物誘導(dǎo)、手術(shù)操作等),使動物呈現(xiàn)出與人類某種疾病相似的病理特征、生理變化及癥狀表現(xiàn)的實驗對象。選擇合適的動物模型,核心在于“相似性”——無論是病因、發(fā)病機制,還是組織病理...
細胞凋亡是細胞程序化的死亡過程,精準(zhǔn)檢測凋亡水平是細胞生物學(xué)、藥理學(xué)等領(lǐng)域的核心實驗手段。目前細胞凋亡實驗的常用方法主要圍繞凋亡不同階段的特征(細胞膜外翻、DNA斷裂、Caspase活化等)設(shè)計,以下是各類方法的原理、操作要點及注意事項。一、AnnexinV-FITC/PI雙染法(檢測早期凋亡)1.實驗原理凋亡早期細胞的磷脂酰絲氨酸(PS)會從細胞膜內(nèi)側(cè)外翻至外側(cè),AnnexinV可與PS特異性結(jié)合;碘化丙啶(PI)無法穿透活細胞完整的細胞膜,僅能對凋亡晚期或壞死細胞的細胞核...
原代細胞(PrimaryCells)是指直接從組織或器官中分離出的細胞,這些細胞保留了其來源組織的特性,通常功能完整,反映生理狀態(tài)。原代細胞與細胞系相比,具有更高的生物學(xué)相關(guān)性,因為它們來自自然狀態(tài)下的活體組織,不經(jīng)過長期的培養(yǎng)和選擇。因此,原代細胞在生物醫(yī)學(xué)研究、藥物篩選和再生醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域中有著廣泛的應(yīng)用。原代細胞的特點1.生理相關(guān)性高:原代細胞能夠反映體內(nèi)細胞的真實狀態(tài),有助于研究生理過程、病理機制。2.壽命有限:原代細胞通常只能傳代有限次數(shù),因為細胞在培養(yǎng)過程中會經(jīng)歷衰老...
Elispot(酶聯(lián)免疫斑點)技術(shù)已成為免疫學(xué)研究中不可或缺的工具,它能夠準(zhǔn)確量化特定淋巴細胞對抗原的反應(yīng)。Elispot掃板讀板則是這一技術(shù)中的關(guān)鍵步驟之一,旨在提高數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性,使研究人員能夠更有效地分析免疫應(yīng)答。掃板讀板的基本原理在Elispot實驗中,細胞因子的分泌結(jié)果以斑點的形式顯示在預(yù)涂有捕獲抗體的微孔板上。每個斑點對應(yīng)于分泌這些細胞因子的單個免疫細胞。掃板讀板技術(shù)的目的是將這些斑點的數(shù)量和分布定量,從而為免疫應(yīng)答的強度提供直觀的視圖。掃板讀板的步驟1....
Elispot(酶聯(lián)免疫斑點)分析是一種高度靈敏的技術(shù),用于檢測和量化特定免疫細胞在體外對抗原的反應(yīng)。該方法特別適用于識別產(chǎn)生特定細胞因子的單個細胞,這使得Elispot成為免疫學(xué)研究、疫苗開發(fā)及腫瘤免疫治療等領(lǐng)域的重要工具。Elispot的基本原理Elispot技術(shù)的核心是利用特定抗原誘導(dǎo)的細胞因子分泌。首先,細胞(通常是淋巴細胞)在含有特定抗原的培養(yǎng)基中孵育。隨后,細胞因子(如干擾素-γ,IL-2等)在細胞周圍的培養(yǎng)基中分泌。通過使用針對這些因子的特異性抗體,結(jié)合酶標(biāo)記和...
藥物臨床前CRO是指專門為制藥公司、biotechnology公司及其它生物制藥公司提供臨床前研究服務(wù)的外包機構(gòu)。臨床前研究是藥物研發(fā)過程中藥物進入人體臨床試驗之前的一個關(guān)鍵階段,主要涉及對藥物的安全性、藥效、毒性、藥代動力學(xué)(ADME)等方面進行全面評估。CRO在藥物開發(fā)過程中扮演著重要的角色,尤其是在臨床前階段,它們幫助制藥公司進行必要的科學(xué)研究和實驗,以確保藥物在進入臨床試驗時具備足夠的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)支持。藥物臨床前CRO的主要職責(zé)和服務(wù)藥物臨床前CRO提供的服務(wù)通常包括以下...
體內(nèi)藥效評價和體外藥效評價是藥物研發(fā)過程中兩種不同的實驗方法,用于評估藥物的效果、機制及安全性。這兩種方法各有優(yōu)缺點,通常需要結(jié)合使用,以便全面了解藥物的生物學(xué)作用。體外藥效評價(InVitro)體外藥效評價指的是在實驗室環(huán)境下,使用細胞或組織等生物模型,模擬人體或動物體內(nèi)的藥物反應(yīng),以評估藥物的作用效果。通常通過體外培養(yǎng)的細胞系、組織切片或器官模型來測試藥物的活性和作用機制。常見體外藥效評價方法:1.細胞增殖與毒性檢測:-通過測量藥物對細胞生長、分裂、死亡等方面的影響來評估...
動物模型是生命科學(xué)和醫(yī)藥研發(fā)領(lǐng)域研究疾病機制、篩選藥物的核心工具,其構(gòu)建需遵循相似性、可重復(fù)性、適用性原則,以下是幾種通用且基礎(chǔ)的構(gòu)建方法,便于快速理解和應(yīng)用。一、誘發(fā)性動物模型構(gòu)建法這是常用的基礎(chǔ)方法之一,通過人工施加物理、化學(xué)、生物等外界因素,誘導(dǎo)動物出現(xiàn)特定疾病或病理狀態(tài)。物理誘導(dǎo)法原理:利用機械損傷、射線照射、溫度刺激等物理手段造模。示例:給大鼠實施大腦中動脈阻塞手術(shù),構(gòu)建缺血性腦卒中模型;通過紫外線長期照射小鼠皮膚,建立皮膚光老化模型;對兔膝關(guān)節(jié)施加機械撞擊,制作骨...